期刊简介
1974年创刊，中华人民共和国卫生部主管，中华医学会主办。本刊是国家级儿科学专业学术期刊，为中国科技论文统计源期刊，中国科技类核心期刊。坚持报道内容科学性、实用性、创新性，对当前儿科领域研究的热点和重点问题加强导向性，报道内容以儿科临床与基础研究并重,是国内唯一专门介绍当代儿科学领域最新进展与最新动态的国家级儿科专业学术期刊。杂志栏目有综述、论著、继续医学教育等，国内外公开发行。
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首页>国际儿科学杂志
- 杂志名称：国际儿科学杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华医学会,中国医科大学
- 国际刊号：1673-4408
- 国内刊号：21-1529/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：2004年荣获卫生部首届全国医药卫生优秀期刊二等奖期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中)
实时定量PCR检测肺炎支原体方法的建立及临床应用
胡文娟；郭东星；王红；黄慧；姜越；王良玉；辛德莉
关键词：肺炎支原体, 儿童, 荧光定量PCR, 诊断
摘要：目的 利用实时定量PCR技术(SYBR Green染料法)建立一种快速、特异、敏感、经济、准确检测肺炎支原体的方法,并评价其在临床上的应用价值.方法 选择肺炎支原体的23SrRNA耐药相关基因作为扩增区,设计特异性引物,然后提取相应质粒作为标准品,建立绝对定量的标准曲线.比较荧光定量PCR方法与传统巢式PCR方法和市售试剂盒的特异度和灵敏度;分别利用上述三种方法和培养法检测临床咽拭子样本,进行相关系数、符合率及kappa系数的分析.结果 实时定量PCR和巢式PCR检测肺炎支原体的灵敏度为10拷贝;市售试剂盒为102拷贝.特异性检验中,肺炎支原体样本检测为阳性,人型支原体和其他4种细菌均检测为阴性.临床样本检测中,实时定量PCR、巢式PCR、市售试剂盒和培养法的阳性率分别为55.49％、52.75％、47.25％和39.01％.统计学分析结果显示,新建实时定量PCR与传统巢式PCR的结果总符合率为89.6％,Kappa系数为0.790.实时定量PCR方法与市售试剂盒检测结果的相关系数R=0.923,P＜0.001;两种方法的总符合率为89.6％,Kappa系数为0.792.实时定量PCR与培养法的结果总符合率为83.5％,Kappa系数为0.678.结论 采用实时定量PCR方法检测肺炎支原体与其它几种方法相比,快速经济,且污染少,特异性强,灵敏度高,具有很重要的科研和临床实用价值.
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